抗酸氏染色液是怎么回事
些化學(xué)制品,相信有不少的人都比較好奇,抗酸氏染色液是怎么回事?這就不得不提起抗酸染色法acid-fast staining method,由1882年由埃利希(F.Ehrlich)提出,并經(jīng)F.Ehrlich)齊爾(Ziehl)改進而創(chuàng)造出的細菌染色法。
抗酸染色的原理:分枝桿菌的細胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì),包圍在肽聚糖的外面,所以分枝桿菌般不易著色,要經(jīng)過加熱和延長染色時間,促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后,就很難被酸性脫色劑脫色,故名抗酸染色。
而齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合物,用鹽酸酒精處理也不脫色。當(dāng)再加堿性美蘭復(fù)染后,分枝桿菌仍然為紅色,而其他細菌及背景中的物質(zhì)為藍色。
抗酸染色的染液配制:
1、石炭酸復(fù)紅:堿性復(fù)紅酒精飽和溶液 10mL、5%石炭酸 90mL;
2、3%鹽酸酒精、濃鹽酸 3mL、95%酒精 97mL;
3、呂氏美蘭液:美蘭酒精飽和液 30mL、氫氧化鉀(1:10000) 100mL;
染色結(jié)果:抗酸菌被染成紅色,為抗酸陽性;其它細菌染成藍色,為抗酸陰性。背景細胞及雜質(zhì)也被染成藍色。
注意事項:
1.染色程度可通過改變?nèi)旧珪r間或染色溫度做適當(dāng)調(diào)整。
2.每次試劑用完后,請迅速蓋好,以免揮發(fā)。
3.石炭酸對皮膚、粘膜有強列刺激性和腐蝕性,使用時請穿實驗服并戴次性手套操作。
在這個域內(nèi),其中頗具代表性的為對結(jié)核菌的齊爾-尼爾森(Ziehl-Neelsen)染色法和齊爾-加貝特(Ziehl-Gabbet)染色法。用石炭酸復(fù)紅染色后,用鹽酸乙醇分色,再用美藍進行對比染色,即不再脫色而呈現(xiàn)石炭酸復(fù)紅的紅色。