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革蘭氏染色法原理分析

文章出處:本站 人氣:5064 發(fā)表時間:2019-07-02 10:46:43

革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中普遍運用的種鑒別染色法,1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)建。未經(jīng)染色之細(xì)菌,由于其與四周環(huán)境折光率差異甚小,故在顯微鏡下難察看。用光學(xué)顯微鏡停止察看,可十分輕松查找并鑒別抗酸桿菌。因而,本染色液在病原微生物學(xué)診斷、研討和教學(xué)工作中,均具有十分重要的意義和適用價值。

步驟

革蘭氏染色法般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個步驟,

具體操作方法是:

1)涂片固定。

2)草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘。

3)自來水沖洗。

4)加碘液覆蓋涂面染約1分鐘。

5)水洗,用吸水紙吸去水分。

6)加95%酒精數(shù)滴,并輕輕搖動進(jìn)行脫色,20秒后水洗,吸去水分。

7)蕃紅染色液(?。┤?分鐘后,自來水沖洗。干燥,鏡檢。

原理

通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時,因失水反而使網(wǎng)孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙。

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