抗酸染色液制造方法有哪些
工業(yè)中的化學(xué)制劑研發(fā),抗酸染色液,通常用于分枝桿菌染色以便直接進行顯微鏡檢查。在這個域中,抗酸染色法也是不容忽視的名詞,那么,抗酸染色液制造方法有哪些?本染色方法系在參照衛(wèi)生組織(WHO)所推薦的標(biāo)準(zhǔn)Ziehl-Neelsen法進行改良的,主要用于對結(jié)核桿菌等抗酸性菌的化學(xué)染色,抗酸染色有兩種常用方法:①堿性復(fù)紅法又稱萋-尼氏(Ziehl -Neelsen)法;②熒光染料金胺0法(也稱金胺羅丹明法)。
抗酸染色液采用的是改良堿性復(fù)紅法,可以不用加溫,屬于Kinyoun冷染色法,無需加熱,相對較抗酸熱染液安全,其染色原理是在室溫條件下分枝菌酸與復(fù)紅結(jié)合成復(fù)合物,經(jīng)亞甲藍復(fù)染后分枝桿菌仍然為紅色,而其他細菌及背景中的物質(zhì)為藍色。
結(jié)核菌、麻瘋桿菌等抗酸性菌,因其菌體表面有層類脂或脂質(zhì)之皮膜而不易著色,但經(jīng)著色后經(jīng)酸性乙醇的作用亦是不容易把它脫色,利用此特性并以增強的染色液予染色,然后再以酸性乙醇加以處理,使其脫色后再對比染色,此時抗酸性菌仍是固定著初色素的顏色(紅色),也就易于鑒別。
抗酸染色般步驟:
1)初染:用玻片夾夾持涂片標(biāo)本,滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴,在火焰高處徐徐加熱,切勿沸騰,出現(xiàn)蒸汽即暫時離開,若染液蒸發(fā)減少,應(yīng)再加染液,以免干涸,加熱3-5分鐘,待標(biāo)本冷卻后用水沖洗。
2)脫色:3%鹽酸酒精脫色30秒~1分鐘;用水沖洗。
3)復(fù)染:用堿性美蘭溶液復(fù)染1分鐘,水洗,用吸水紙吸干后用油鏡觀察。
抗酸染色法的細菌染色法,其中代表性的為對結(jié)核菌的齊爾-尼爾森(Ziehl-Neelsen)染色法和齊爾-加貝特(Ziehl-Gabbet)染色法,用石炭酸復(fù)紅染色后,用鹽酸乙醇分色,再用美藍進行對比染色,即不再脫色而呈現(xiàn)石炭酸復(fù)紅的紅色。