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抗酸染色液染色原理及作用

文章出處:本站 人氣:5363 發(fā)表時間:2019-03-03 17:19:57

抗酸染色法acidfast staining method 1882年由埃利希(FEhrlich)創(chuàng)并經(jīng)FEhrlich)齊爾(Ziehl)改進(jìn)而創(chuàng)造出的細(xì)菌染色法。其中具代表性的為對結(jié)核菌的齊爾-尼爾森(ZiehlNeelsen)染色法和齊爾-加貝特(ZiehlGabbet)染色法。用石炭酸復(fù)紅染色后,用鹽酸乙醇分色,再用美藍(lán)進(jìn)行對比染色,即不再脫色而呈現(xiàn)石炭酸復(fù)紅的紅色。

抗酸染色的原理:

分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì),包圍在肽聚糖的外面,所以分枝桿菌般不易著色,要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后,就很難被酸性脫色劑脫色,故名抗酸染色。

-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合物,用鹽酸酒精處理也不脫色。當(dāng)再加堿性美蘭復(fù)染后,分枝桿菌仍然為紅色,而其他細(xì)菌及背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。

抗酸染色的染液配制:

1、石炭酸復(fù)紅

   堿性復(fù)紅酒精飽和溶液 10mL

   5%石炭酸 90mL

2、3%鹽酸酒精

   濃鹽酸 3mL

   95%酒精 97mL

3、呂氏美蘭液

   美蘭酒精飽和液 30mL

    氫氧化鉀(1:10000 100mL

染色結(jié)果:

抗酸菌被染成紅色,為抗酸陽性;其它細(xì)菌染成藍(lán)色,為抗酸陰性。背景細(xì)胞及雜質(zhì)也被染成藍(lán)色。

注意事項:

1.染色程度可通過改變?nèi)旧珪r間或染色溫度做適當(dāng)調(diào)整。

2.每次試劑用完后,請迅速蓋好,以免揮發(fā)。

3.石炭酸對皮膚、粘膜有強(qiáng)列刺激性和腐蝕性,使用時請穿實驗服并戴次性手套操作。

推薦產(chǎn)品:革蘭氏染色液(4*250ml)

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