抗酸染色法改進(jìn)創(chuàng)造的細(xì)菌染色方法
抗酸染色法改進(jìn)創(chuàng)造的細(xì)菌染色方法。其中,齊爾-尼爾森是具有代表性的結(jié)核菌。(Ziehl-Neelsen)齊爾-加貝特染色法和(Ziehl-Gabbet)染色方法。用石炭酸復(fù)紅染色后,用鹽酸酒精調(diào)色,再用美藍(lán)對(duì)比染色,即石炭酸復(fù)紅不再褪色。
抗酸染色原理:
分枝桿菌的細(xì)胞壁含有大量的脂肪,被肽聚糖包圍,所以分枝桿菌不容易上色,需要加熱和增加染色時(shí)間來上色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后,酸性脫色劑很難褪色,故稱抗酸染色。
齊-尼氏抗酸染色法是將分枝菌酸與石炭酸在加熱環(huán)境中復(fù)合成復(fù)合物,用硫酸乙醇處理后不會(huì)褪色。加入偏堿美蘭復(fù)染后,分枝桿菌仍為紅色,背景中的其他細(xì)菌和物質(zhì)為藍(lán)色。
抗酸染色染液配制:
1、石炭酸復(fù)紅
堿性復(fù)紅乙醇飽和溶液10毫升
石炭酸5%90mL
2、3%硫酸乙醇
濃鹽酸3mL
95%乙醇97mL
3、呂氏美蘭液
30毫升美蘭乙醇飽和液
氫氧化鉀(1:10000)100mL
染色結(jié)果:
抗酸菌被染成紅色,抗酸陽性;其他細(xì)菌被染成藍(lán)色,抗酸陰性。背景細(xì)胞和雜質(zhì)也被染成藍(lán)色。
注意事項(xiàng):
通過改變?nèi)旧珪r(shí)間或染色溫度,可以適當(dāng)調(diào)整染色水平。
每一次試劑用完后,請(qǐng)迅速蓋上,以防揮發(fā)。
石炭酸對(duì)皮膚、粘膜有很強(qiáng)的刺激性和腐蝕性,使用時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服和次性手套。
推薦產(chǎn)品:革蘭氏染色液(4*250ml)