抗酸染色能支持的陽性細(xì)菌包含哪些?
抗酸染色陽性的細(xì)菌,就是分枝桿菌屬的細(xì)菌,換句話說,分枝桿菌屬的特征就是抗酸染色陽性。
比如:結(jié)核分支桿菌和麻風(fēng)分支桿菌
抗酸染色法主要用于鑒別什么細(xì)菌? 抗酸染色法主要是用強(qiáng)染劑——石炭酸復(fù)紅加溫染色,以促使菌體著色,然后以鹽酸酒精脫色,再用呂氏美藍(lán)復(fù)染。目前認(rèn)為抗酸性細(xì)菌——分枝桿菌屬細(xì)菌細(xì)胞中含有分枝菌酸,能與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合,而不易被脫色,故保留紅色;非抗酸性細(xì)菌則不含分枝菌酸,能被鹽酸酒精脫色,故復(fù)染時(shí)被美藍(lán)染成藍(lán)色。抗酸染色法主要用以鑒別抗酸性與非抗酸性細(xì)菌。
1、原理與應(yīng)用
結(jié)核分枝桿菌對苯胺染料般不易著色,若加溫或延長染色時(shí)間使其著色后,再用3%鹽酸酒精處理也不易脫色,經(jīng)此染色后,結(jié)核分枝桿菌及其他分枝桿菌呈紅色,而非抗酸菌和細(xì)胞雜質(zhì)等呈藍(lán)色。
2、材料
(1)結(jié)核病人痰
(2)抗酸染色液
(3)玻片、片夾、濾紙片、竹簽、空平皿、污物盆。
3、方法
(1)取潔凈的竹簽沾取痰中血絲或膿性痰,在清潔無油脂玻片上涂開。涂抹區(qū)約拇指蓋大。用過的竹簽放到空平皿內(nèi)待高壓滅菌。
(2)涂片自然干燥后,用片夾挾住玻片端,通過火焰固定。
(3)涂抹面用濾紙片蓋上,然后往濾紙片上滴加石炭酸復(fù)紅染液,使濾紙片完全被染液浸濕,持玻片在小火上加溫片刻然后離開火焰,此時(shí)可見到玻片上冒出蒸氣。待蒸氣消失后再加溫,如此反復(fù)3~4次,約5min,加溫時(shí)隨時(shí)添加染液勿使紙片干涸。
(4)玻片冷卻后,用接種環(huán)挑去濾紙扔到污物盆內(nèi),流水沖洗玻片。
(5)滴加3%鹽酸酒精脫色,至涂抹均勻部位基本沒有紅色再脫下為止,水洗??顾崛旧珯C(jī)可支持染色步驟。
(6)滴加呂氏美藍(lán)染液30sec,水洗。
(7)吸干、鏡檢。
4、溶液配制
萋-尼(Zichl-Neelsen)抗酸染色液
(1)石炭酸復(fù)紅液:鹼性復(fù)紅4g,溶于95%酒精100ml,作成飽和溶液,再取該飽和液10ml與5%石炭酸溶液90ml混勻即成。
(2)3%鹽酸酒精液。
濃鹽酸3ml加入95%酒精97ml中即成。
(3)呂(Loeffer)氏美藍(lán)染色液-抗酸染色機(jī)的試劑成分之。
美藍(lán)2g,溶于95%酒精100ml中,作成飽和液。再取該飽和液30ml與0.01%氫氧化鉀水溶液100ml混合均勻即可。