革蘭氏染色法的染色差異
革蘭氏染色法的染色的差異主要是由于陰性與陽性細(xì)菌細(xì)胞壁的差異所引起的。
1.革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁 G+細(xì)菌細(xì)胞壁具有較厚(20-80nm)而致密的肽聚糖層,多達(dá)50層,占細(xì)胞壁成分的40%~95%,它同細(xì)胞膜的外層緊密相連。有的G+細(xì)菌細(xì)胞壁中含有磷壁酸,也稱胞壁質(zhì)(murein),它是甘油和核糖醇的聚合物,磷壁酸通常以糖或氨基酸的酯而存在。由于磷壁酸帶負(fù)電荷,它在細(xì)胞表面能調(diào)節(jié)陽離子濃度。磷壁酸與細(xì)胞生長有關(guān),細(xì)胞生長中有自溶素(autolysins)酶類起作用,磷壁酸對自溶素有調(diào)節(jié)功能,阻止胞壁過度降解和壁溶。 如果細(xì)胞壁的肽聚糖層被消溶,G+細(xì)胞成為原生質(zhì)體(protoplasts),細(xì)胞壁不復(fù)存在,而只存留細(xì)胞膜。除鏈球菌外,大多數(shù)G+細(xì)菌細(xì)胞壁中含少蛋白質(zhì)。
2.革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁 G—細(xì)菌細(xì)胞壁比G+細(xì)菌細(xì)胞壁薄(15~20nm)而結(jié)構(gòu)較復(fù)雜,分外膜(outer membrane)和肽聚糖層(2~3nm)。在細(xì)胞壁和細(xì)胞質(zhì)膜之間有個(gè)明顯的空間,稱為壁膜間隙(periplasmic space)。 外膜 G—細(xì)菌細(xì)胞壁外膜的基本成分是脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),它同細(xì)胞質(zhì)膜相同之處也是雙層類脂,但除磷脂外還含有多糖和蛋白質(zhì)。 LPS的多糖部分包括核心多糖和O-特異多糖。O-特異多糖由重復(fù)分支的碳水化合物分子組成,含有已糖(葡萄糖、半乳糖和鼠李糖)和二脫氧已糖。由于糖的種類不同,使各種G—細(xì)胞具有不同特性的LPS。核心多糖(corepolysaccharide)的主要組分是酮脫氧辛酸(ketodeoxyoctonate, KDO)。外膜中還含有幾種蛋白,如脂蛋白、通透蛋白。有些蛋白具有通孔作用(porin),調(diào)控外界分子進(jìn)入細(xì)胞;有的蛋白分子可以作為噬菌體的受體;許多G—細(xì)菌對高等生物有致病性是由LPS的成分決定的,它的毒性組分常稱為內(nèi)毒素(endotoxins)。 肽聚糖層 G—細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖層很薄,在大腸桿菌和其它細(xì)菌中僅有單層。
肽聚糖層和外膜的內(nèi)層之間通過脂蛋白連接起來。 壁膜間隙 G—細(xì)菌細(xì)胞壁的外膜與細(xì)胞質(zhì)膜之間存在明顯的壁膜間隙,層薄的肽聚糖處于其間,肽聚糖層和細(xì)胞質(zhì)膜之間的間隙較寬,肽聚糖層至外膜之間的間隙較窄。大腸桿菌的壁膜間隙寬度為12~15nm,呈膠胨態(tài)。其間含有三類蛋白質(zhì):水解酶,催化食物的初步降解;結(jié)合蛋白,啟動物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過程;化學(xué)受體(chemoreceptors),在趨化性中起作用的蛋白。