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革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的種鑒別染色法，1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立

細菌先經(jīng)堿性染料結晶染色，而經(jīng)碘液媒染后，用酒精脫色，在定條件下有的細菌此色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽性菌（G+），后者為革蘭氏陰性菌（G—）。為觀察方便，脫色后再用種紅色染料如堿性蕃紅等進行復染。陽性菌仍帶紫色，陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和大多數(shù)和球菌，以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏正反應；弧菌，螺旋體和大多數(shù)致病性的無芽胞桿菌都呈現(xiàn)負反應。

[原理]：革蘭氏染色目前有三種觀點：等電點學說、化學學說和滲透學說。

1．等電點學說，革蘭氏陽性菌的等電點在PH2-3，比陰性菌（PH4-5）低，加之碘為弱氧化劑，可降低革蘭氏陽性菌的等電點，致使兩類菌的等電點差異擴大，因此陽性菌和堿性染料的結合力比陰性菌更強。

2．化學學說，碘液在菌體內(nèi)與結晶紫結合后又和菌體內(nèi)核糖核酸鎂鹽-蛋白質(zhì)復合物結合，此結合物不易被丙酮酒精脫掉，呈革蘭氏染色陽性。因革蘭氏陰性菌缺乏核糖核酸鎂鹽，故對碘與結晶紫結合物攝取少，且不牢固，易被丙酮酒精脫色而呈革蘭氏染色陰性。

3．滲透學說，乙醇使陽性菌所含粘肽多糖脫水而致細胞壁間隙縮小，通透性降低，在菌體內(nèi)保留了染料-碘復合物，呈紫色。陰性菌含粘肽少，細胞壁變化不大，通透性不受影響，菌體內(nèi)的染料-碘復合物較易透出，失去紫色，被復染成為紅色。