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革蘭氏染色方法

文章出處:本站 人氣:2434 發(fā)表時(shí)間:2020-05-19 17:27:09

革蘭氏染色方法:

1、涂片:利用移液槍吸取10ul的菌液滴在載玻片,用燒紅的涂菌棒涂抹均勻,面積適中。

2、干燥與固定:將載玻片放置在酒精燈火焰上方定距離處,涂菌面向上,將菌液烤干,溫度不宜過高,炙烤不宜時(shí)間太長,固定就是將涂菌面向上,載玻片快速在火焰中過2-3次。

3、初染:在菌液面上滴加1-2滴草酸銨結(jié)晶紫,染色1min

4、水洗:在小股水流下沖洗,直至無色為止。

5、媒染:吸取300ul碘液滴在樣本上,染色1min。

6、水洗:在小股水流下沖洗,直至無色為止。

7、脫色:傾斜玻片,滴加95%的乙醇,約30s,再水洗次。

8、復(fù)染:在樣本上滴加沙黃染液1-2滴,染色1min。

9、水洗:在小股水流下沖洗,直至流過玻片的水無色為止。

10、干燥與觀察:用紙擦去水,干燥后在顯微鏡下觀察,菌體呈現(xiàn)紫色的是革蘭氏陽性菌,呈現(xiàn)紅色的是革蘭氏陰性菌。

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