網友分享亚洲午夜a心得_亚洲裸男gay同性自慰网站_万里长征黑料传送门_午夜av不卡免费看_少妇高潮喷潮久久久影院_欧美黄色片网址_加勒比一本大道在线_国产 精选 bt 天堂_天堂在线无码在线_午夜福利伦理电影

聯(lián)系我們
  • 郵編:238000
  • 電話:0551-82394568
  • 地址:安徽省巢湖市向陽南路科技創(chuàng)新園A2-B5

瑞氏染色液的染液配制

文章出處:本站 人氣:1544 發(fā)表時間:2021-11-10 10:22:56

瑞氏染色液的染液配制:

溶劑

用甲醇作瑞氏染料溶劑,即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶劑,有兩種作用:

( 1 )甲醇使瑞氏染料中美藍( M )與伊紅( E )在溶液中離解,可使細胞成分選擇性吸附其中的有色物質而著色。 在配制的瑞氏染液中美藍如放置過久即可氧化而含有天青,美藍天青與伊紅化合物能使核染成紫紅色,但不能使胞漿染為藍色,多余 美藍就可以 使胞漿染成藍色,染色主要是化學作用,是離子彼此結合的反應。

( 2 )甲醇具有強大的脫水力,可將細胞固定在一定形態(tài)及增加細胞結構的表面積,提高細胞對染料吸收作用,同時由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升溫,加速染色反應。

瑞氏染液配制:

瑞氏染料 830mg 或 1g

甲醇( AR ) 500ml 或 600ml

先稱干燥瑞氏染料(事先放入溫箱干燥過夜)放置乳缽內, 用乳棒輕輕敲染料成粉末狀,再研磨至細粉末狀(聽不到研芝麻聲)。加少許甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸內顯“一面鏡”光澤而無染料粉粒沉著后,再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮。靜置片刻,將上層液體倒入一清潔儲存瓶內(用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重復數(shù)次,直至乳缽內染料及甲醇用完為止。染料完全轉移至儲存瓶后,搖勻,密封瓶口,室溫下避光保存,儲存愈久,則染料溶解、分解就越好,一般儲存 3 個月以上為佳。

瑞氏染色液的緩沖液

1) 緩沖液作用:染色對氫離子濃度是十分敏感的,據(jù)觀察 pH 值的改變,可使蛋白質與染料形成的化合物重新離解。 緩沖液須保持 一定的 pH 使染色穩(wěn)定, PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8 ,偏堿性染料可與緩沖液中酸基中和,偏酸性染料則與緩沖液中的堿基中和,使 pH 穩(wěn)定。

2) 緩沖液配制( pH6.4~6.8 ,弱酸性):

配方 1 : 配方 2 :

1% KH 2 PO 4 30ml M/15 KH 2 PO 4 73.5 ml

1% Na 2 HPO 4 20ml M/15 Na 2 HPO 4 26.5ml

H 2 O( 新鮮 ) 加至 1000ml

置室溫黑暗處,瓶口密封,防止霉菌污染,如有污染則應報廢。

標簽:
相關產品