巴氏染色液操作時(shí)需要注意這些
巴氏染色液的注意事項(xiàng)，使用場(chǎng)所應(yīng)通風(fēng)，涂片厚薄適宜，固定后方可染色，制片用高于95％以上濃度的乙醇固定后會(huì)出現(xiàn)染色過(guò)深，應(yīng)用95％乙醇固定。蘇木精染液上有一層金屬膜，下有結(jié)晶沉淀，使用前應(yīng)用濾紙過(guò)濾。蘇木精染液在染夠2000～3000張玻片后應(yīng)更換新的染液。蘇木精的染色時(shí)間隨氣溫和染液情況而改變。染液以覆蓋涂片為宜，過(guò)少因蒸發(fā)導(dǎo)致染料沉淀。鹽酸酒精分化的作用為分化掉胞漿上沾上的蘇木素，因此時(shí)間不宜長(zhǎng)，但如果分化不夠，會(huì)造成細(xì)胞核顏色過(guò)深或（及）胞漿很難上色；分化后立即用自來(lái)水沖洗，不宜久置，否則可使顏色消失。返藍(lán)亦稱堿化，返藍(lán)時(shí)間偏短則著色不充分，影響染色效果，碳酸鋰每缸過(guò)500張玻片更新。橘黃G染色時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則EA50不易上色；橘黃每缸過(guò)1000張玻片更新。EA50或EA36使用前要充分?jǐn)嚢瑁旧^(guò)程中提拿、旋轉(zhuǎn)染色架數(shù)次。每缸過(guò)1000～1800張玻片后更新。
技術(shù)人員操作要流暢，動(dòng)作干凈利落，不可把上一缸染色液帶入下一缸，每缸交替時(shí)要甩干玻片上殘存液體。細(xì)胞漿著色不佳應(yīng)考慮的因素。如果全片內(nèi)胞漿都淡染，則需延長(zhǎng)染色時(shí)間或更換新液。如果胞漿不分色或均為淺紅色，適當(dāng)增加染色時(shí)間能夠部分糾正不分色狀況。胞漿染成灰色或紫色是由于蘇木素染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或鹽酸酒精分化不佳，經(jīng)過(guò)褪色后重新蘇木素染色可以糾正。由于標(biāo)本的不同，同樣配方的EA染液可造成偏藍(lán)、偏綠和偏紅，對(duì)不同的標(biāo)本應(yīng)使用不同的EA染液，一般認(rèn)為：EA36和EA50較適用于婦科標(biāo)本，而EA65或改良EA較適用于非婦科標(biāo)本。胞漿不分色的另一重要原因是由于EA染液的pH值不恰當(dāng)所致。如染色為紅色，可加少許磷鎢酸溶液糾正。如染色均為藍(lán)色或綠色，可加少許飽和碳酸鋰溶液糾正。
對(duì)于改良EA染液，每100ml染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳，染液使用更持久。細(xì)胞核著色不佳應(yīng)考慮的因素，細(xì)胞核著色過(guò)淺，鹽酸分化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或蘇木精染色液使用時(shí)間過(guò)短，需要縮短分化時(shí)間或延長(zhǎng)堿化時(shí)間。蘇木精染色液缸中每日加入少量新鮮蘇木精染液。細(xì)胞核著色過(guò)深，鹽酸溶液濃度不夠，適當(dāng)加入幾滴鹽酸以增加濃度，返藍(lán)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，則可縮短返藍(lán)時(shí)間或用水充分漂洗。生產(chǎn)批號(hào)、有效期見(jiàn)外包裝。
