使用巴氏染色液后結(jié)果不理想的原因有哪些？
巴氏染色液染片胞漿、胞核、胞膜清晰、易辨，紅藍(lán)相間。進(jìn)口原料配制，染液的穩(wěn)定性好，無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)刺激、吸附性強(qiáng)、不脫色，對(duì)涂片無(wú)特殊要求。研制的改良巴氏染液染色全程只需要5分鐘，改良巴氏染液染色全程只需要3分鐘，且步驟簡(jiǎn)單，只需初染—復(fù)染—增色三步，省時(shí)、準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)便，即來即檢，立等可取檢查結(jié)果，無(wú)需梯度酒精脫水，二甲苯透明，可直接封片保存。
檢驗(yàn)原理：
巴氏染色液中有蘇木素、橘黃、伊紅、俾士麥棕及亮綠等染料，其中蘇木素能與細(xì)胞核的核酸結(jié)合而顯紫藍(lán)色，其他染料可以與細(xì)胞漿中不同的化學(xué)成分結(jié)合而顯顏色。
使用方法：
1.將涂片置于95%乙醇中固定15分鐘以上；
2.依次浸入80%、50%乙醇中各30秒，水洗1～2分鐘；
3.浸入蘇木精染液中3～5分鐘，水洗1～2分鐘；
4.浸入鹽酸酒精分化液中分化數(shù)秒，水洗1～2分鐘；
5.浸入返藍(lán)液中數(shù)秒，水洗1～2分鐘；
6.置于95%乙醇中漂洗，水洗甩干；
7.浸入橘黃G染液染中1～3分鐘；95％乙醇漂洗、95％乙醇漂洗、100%乙醇漂洗各一次，時(shí)間各10～20秒；
8.浸入EA36染液(或EA50染液)中染色2～5分鐘，95％乙醇漂洗、95％乙醇漂洗、100%乙醇漂洗各一次，時(shí)間各10～20秒；
9.浸入浸蠟脫蠟透明液中2分鐘；
10.中性樹膠封固；
11.鏡檢。
染色結(jié)果：
上皮細(xì)胞：胞核呈紫藍(lán)色，核仁紅色；胞質(zhì)受色隨分化程度和細(xì)胞類型不同可染成藍(lán)綠色、粉紅色或桔黃色；紅細(xì)胞：鮮紅色或橙紅色。白細(xì)胞：胞核藍(lán)紫色，胞質(zhì)淡藍(lán)或淡綠色；粘液：淡藍(lán)或粉紅色。
使用巴氏染色液染色結(jié)果不理想原因分析：
1、細(xì)胞核著色不佳
（1）細(xì)胞核著色過淺：
鹽酸分化時(shí)間過長(zhǎng)或蘇木素染液時(shí)間過長(zhǎng)。需要縮短分化時(shí)間或延長(zhǎng)堿化時(shí)間；每日加入少量新鮮蘇木素染液或重新配制蘇木素液。
在固定之前制片干燥。所以對(duì)巴氏染色的制片需要嚴(yán)格遵守濕固定的原則。
自來水的PH值偏酸性。使用堿性溶液。
（2）細(xì)胞核著色過深：
鹽酸溶液濃度不夠。適當(dāng)加入幾滴鹽酸以增加濃度。
制片用高于95％以上濃度的酒精固定后可以出現(xiàn)染色過深。應(yīng)用95％酒精固定。
2、細(xì)胞漿著色不佳
（1）如果全片內(nèi)胞漿都淡染，則需要延長(zhǎng)染色時(shí)間或更換新液。
（2）如果胞漿不分色，均為淺紅色。制片在固定前干燥或制片被有大量球菌樣細(xì)菌影響胞漿染色。此情況可以適當(dāng)增加染色時(shí)間能夠部分糾正不分色狀況。
（3）胞漿染成灰色或紫色，是由于蘇木素染色時(shí)間過長(zhǎng)或鹽酸分化不佳。經(jīng)過褪色后重新蘇木素可以糾正。
（4）由于標(biāo)本的不同，同樣配方的EA染液可造成偏藍(lán)、偏綠和偏紅，對(duì)不同的標(biāo)本應(yīng)該使用不同的EA染液。一般認(rèn)為，EA36和EA50用于婦科標(biāo)本，而EA65或改良EA用于非婦科標(biāo)本。
（5）胞漿不分色的另一重要原因是由于EA染液的PH值不恰當(dāng)所致。如染色為紅色，可以加少許磷鎢酸溶液糾正；如染色均為藍(lán)色或綠色，可以加少許飽和碳酸鋰溶液糾正。對(duì)于改良EA染液，每100ml染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳；染液使用更持久。
